Бърз тест на аденовирус - назална секреция

Предназначение:

Комплектът за тест за нуклеинова киселина SARS-CoV-2 се прилага за качествено откриване на нуклеинова киселина на COVID-19 в назофарингеални тампони, орофарингеални тампони и храчки. Резултатите от теста осигуряват основа за молекулярна диагноза за инфекция или предполагаеми пациенти и не трябва да се използват като единствен критерий за клинична диагноза.

материали:

Процедура за изпитване:

A. Подготовка на пробата

Извлечената РНК е изходният материал за тестовия комплект за SARS-CoV-2 нуклеинова киселина.

Важно: Всяка процедура за екстракция на нуклеинова киселина трябва да се извършва едновременно с една положителна контрола (40 μL, разреждане със стерилни физиологични разтвори/PBS до желания обем) и една отрицателна контрола (40 μL, разреждане със стерилни физиологични разтвори/PBS до желания обем).

Препоръчва се използването на следните търговски комплекти за екстракция на нуклеинови киселини: PureLinkTM Mini Kit за вирусна РНК/ДНК (Invitrogen); Мини комплект вирусна РНК (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA комплект (TIANGEN);

B. Настройка на реакционната смес

1. Всички реагенти и проби трябва да бъдат напълно размразени, смесени напълно и центрофугирани за кратко при стайна температура (приблизителен диапазон от 18 до 25 градуса) преди употреба.

2. Пригответе необходимия обем от реакционната смес в подходящо оразмерена полипропиленова микроцентрофужна епруветка.

3. Пипетирайте 25 µL от реакционната смес във всяка необходима ямка на подходяща оптична 96-реакционна плака или подходяща оптична реакционна епруветка.

В. Добавяне на шаблон

1. Добавете 5 μL екстрахирана РНК от Проби/Положителна контрола/Отрицателна контрола. Общият обем е 30 μL.

2. Смесете старателно пробите и контролите с реакционната смес чрез пипетиране нагоре и надолу/Вортекс.

3. Затворете реакционната плоча на 96-ямката с подходящи капаци или оптично залепващо фолио и реакционните епруветки с подходящи капаци.

4. Центрофугирайте реакционната плака с 96-ямка в центрофуга с ротор на микротитърна плака за 30 секунди при приблизително 2500 rpm.

D. Програмиране на PCR инструмента в реално време

За основна информация относно настройката и програмирането на различните PCR инструменти в реално време, моля, вижте ръководството за потребителя на съответния инструмент. Анализът е оптимизиран за системата ABI7500 PCR в реално време. PCR тестът се извършва при условия на цикличност, както е описано в таблицата по-долу.

Определете флуоресцентните детектори

*Моля, задайте вътрешната референция за флуоресценция на инструмента на „Няма“, например: За инструменти от серия ABI задайте „Пасивна референтна информация“ на „Няма“.

E. Анализ на данните

Моля, задайте параметрите за анализ и анализирайте данните в съответствие с инструкциите за експлоатация на съответните инструменти.

Вземете ABI 7500 като пример:

Базовата линия трябва да бъде настроена на диапазон, който елиминира фоновата флуоресценция, открита в ранните цикли на усилване, но който не припокрива областта, където сигналите за усилване се издигат над фона (Начална стойност: 3~10; Крайна стойност: {{2} }). Прагът на цикъла (Ct) трябва да бъде в основата на експоненциалната фаза. Щракнете върху „Анализ“, за да получите резултата от анализа автоматично, и прочетете резултата от откриването в прозореца „Отчет“.

Популярни тагове: аденовирус бърз тест-назален секрет, Китай, доставчици, производители, фабрика, насипно състояние